Mikä on primäärisen vasta -aineen tarkoitus Western blotissa?
Mikä on primäärisen vasta -aineen tarkoitus Western blotissa?

Video: Mikä on primäärisen vasta -aineen tarkoitus Western blotissa?

Video: Mikä on primäärisen vasta -aineen tarkoitus Western blotissa?
Video: Израиль | Святая Земля | Фавор - гора Преображения Господня 2024, Heinäkuu
Anonim

Suoralla havaitsemismenetelmällä entsyymi- tai fluoroforikonjugoitu primaarinen vasta -aine käytetään havaitsemaan kiinnostava antigeeni tahra . Epäsuorassa havaitsemismenetelmässä merkitsemätön primaarinen vasta -aine käytetään ensin sitoutumaan antigeeniin.

Lisäksi mikä on primaarinen vasta -aine Western blotissa?

The primaarinen vasta -aine tunnistaa ja sitoo kiinnostuksen kohteena olevan proteiinin epitoopin tai spesifisen aminohapposekvenssin. Toissijainen vasta -aineita käytetään western blotting ovat tyypillisesti konjugoituja entsyymin kanssa; yleisimmin käytetyt entsyymit ovat piparjuuriperoksidaasi (HRP) ja alkalinen fosfataasi (AP).

Lisäksi mitä ensisijainen vasta -aine tekee? Ensisijaiset vasta -aineet ovat immunoglobuliineja, jotka sitoutuvat tiettyyn antigeeniin ( proteiinia , peptidi, pieni molekyyli jne.) ja ovat tyypillisesti konjugoimattomia. Hyvä primaarinen vasta -aine tunnistaa ja sitoutuu suurella affiniteetilla ja spesifisyydellä puhdistamaan, havaitsemaan ja mittaamaan antigeenin.

Mikä on siis Western blotin tarkoitus?

A western blot on laboratoriomenetelmä, jota käytetään tiettyjen proteiinimolekyylien havaitsemiseen proteiiniseoksen joukosta. Seuraavaksi proteiinimolekyylit erotetaan koon mukaan geelielektroforeesiksi kutsutulla menetelmällä. Erottamisen jälkeen proteiinit siirretään geelistä a tahroja kalvo.

Miten vasta -aineita käytetään Western -blottauksessa?

Vasta -aineet ovat käytetty kohdeproteiinien havaitsemiseksi western blot (immunoblotti). The vasta -aineita on konjugoitu fluoresoivilla tai radioaktiivisilla leimoilla tai entsyymeillä, jotka antavat myöhemmin reaktion levitetyn reagenssin kanssa, mikä johtaa värin muodostumiseen tai valon emittointiin, mikä mahdollistaa havaitsemisen.

Suositeltava: